animal cell culture, fish cell culture
Introduction 조직배양은 유기체로부터 분리한 세포나 조직의 배양으로 배양배지에서 조직을 살아있고 성장가능하게 만드는 기술이다. 진핵세포는 대부분의 원핵생물들에 비해 배양하기가어렵다. 복잡한 media를 요구하고, 박테리아, 효모 및곰팡이와 같은 미생물에 의해 오염되기 쉽다. cell culture 에 쓰이는 기본적 media에는 아미노산,비타민,무기염류,당류,탄산수소나트륨이 들어간 기본합성배지에 FBS와 같은 혈청, 세균증식억제를 위한 항생제가 들어간다. DMEM(Dulbeco"s Modified Eagle"s Medium)은 가장 일반적으로 사용되는 animal cell culture용 media이다. 진핵세포 배양에는 세종류가 있는데 Primary cells, Secondary cells, ..
2011. 3. 22.
DNA prep, gel electrophoresis, Southern blotting
DNA를 분리하고, gel electrophoresis와 Southern blotting을 순서대로 실시했다. 먼저 DNA를 얻기 위해 DNA를 정제했다. E.coli에 Sol I, II, III를 처리하여 세포벽과 세포막을 깨고, 그 외 단백질과 균의 genomic DNA를 제거하고 kit를 이용해 순수하게 plasmid DNA를 분리했고, C.elegans에 위 시약과 유사한 역할을 하는 ATL buffer, proteinase K, AL buffer 등을 통해 단백질, 세포막을 제거하고, 100% ETOH로 DNA를 침전시켜 genomic DNA를 얻었다. 이렇게 순수 분리한 DNA의 size를 알아내기 위해 Agarose gel 전기영동을 실시했다. 전기영동을 하기 전에 cuvette에 100㎕로..
2010. 4. 18.
