대학 과제 및 리포트/유전학 실험-생물학과11 UvrABC mutaion e-coli의 UV에 의한 DNA손상과 DNA Repair 튜브7중1개는 LB 800람다 넣고 나머지는 900람다넣음 800람다넣은곳에샘플200람다 볼텍싱한뒤 100람다를 따서 다른 배지가 있는 튜브에 넣는다 7번째튜브까지희석 100람다 따서 플레이트에 뿌린뒤 로딩. 자외선의 세기와 시간을 다르게 해서 대장균에 자외선 쬐여주기 배양후관찰 이번 실험은 uv에 의한 e-coli의 dna손상에 대한 실험이었다. uv는 0J, 5J, 10J, 25J, 50J, 100J 로 나누어 실험 하였다. 배지로 계속 희석시켜주는것은 e.coli의 수를 줄여 counting 하기 쉽게하기 위해서이다. uv는 돌연변이원(mutagen)으로써 thymine 과 인접 thymine의 공유 결합을 형성하여 thymine dymer를 형성한다. 따라서 DNA polymerase가 읽을 때 .. 2009. 12. 11. 돌연변이원(mutagen) ▶Chemical mutagens 돌연변이 원으로서 알려진 많은 화학물질 중의 하나는 nitrous acid이다. Figure 8.17은 DNA가 nitrous acid에 노출되었을 때 Adenine의 base pair가 Thymine대신 Cytosine으로 전환되는 방법을 나타낸다. 변형된 Adenine을 가진 DNA가 복제되면 하나의 daughter DNA는 그의 parent DNA와는 다른 base pair sequence를 갖게 된다. 결국 granddaughter cell에서는 일부 A-T base pair가 G-C base pair로 바뀔 것이다. nitrous acid는 DNA의 특정한 base pair를 변화시킨다. 모든 돌연변이 원과 같이 nitrous acid는 무작위적 위치에서 DNA.. 2009. 12. 3. plasmid DNA preporation plasmid DNA preporation cell 80ul를 e-tube에 준비 centrifuge 14000RPM 5min 상층액 제거 pellet에 sol.1 200ul add. 상온 5min 고루 섞이도록 vortex 후 상온 5min sol.2 400ul add inverting 15회 상온 5min sol.3 300ul add inverting 15회 상온 5min centrifuge 14000RPM 10min 4'c 상층액을 다른 tube로 900ul옮긴다 isopropanol 600ul add 상온 5min centrifuge 14000RPM 15min 4'c 상층액 제거 70% EtOH 1ml add centrifuge 14000RPM 10min EtOH 제거 overdry TDW+RNa.. 2009. 12. 2. Electrophoresis, buffer 전기영동이란, 용액에 전류를 통했을때 용액중의 하전입자가 양극 또는 음극으로 이동하는 현상을 말하며, 전압의 차이가 발생한 field에서 음전하를 띤 입자는 양극(anode) 을 향해 이동하고 , 양전하를 띤 입자는 음극(cathode)을 향해 이동한다. 전기영동은 주로 단백질 관련 물질 또는 유사한 성질을 가진 물질이 대상이 된다. 단백질은 1차구조인 amino산이 acidic carboxyl group과 basic amino group을 가지고 있으며, 같은수의 양전 하와 음전하를 가지고 있는 상태인 순전하(net charge)는 전기적으로 중성이므로, 전장 (electric field)에서 움직이지 않는다. 그러나 아미노산이 용매중의 물과 반응하면 amino group은 alkali성을 띠고, ca.. 2009. 11. 25. bacteria 의 transformation introduction transformation은 유전자가 삽입된 플라스미드 vector를 대장균세포속으로 도입하는 과정이다. 형질전환이 연구는 그리피스의 죽은 병원성 폐렴쌍구균의 DNA가 비병원성 폐렴쌍구균을 병원성으로 전환시키는것을 확인한 실험에서부터 시작되었다. 형질전환은 small DNA보다 large DNA 의 효율이 떨어지며 DNA의 양이 너무 많아도 좋지 않으므로 적당한 길이와 적당한 양의 DNA를 사용하는것이 중요한 요소이다. natural transformation - 몇 몇 박테리아는 특별한 처리 없이 DNA를 교환한다. -single strand dna artifical transformation -single and double strand dna - chemical treatme.. 2009. 11. 13. 암세포(cancer cell) 관찰 introduction (mitosis, meiosis) methods cell을 10ul씩 따서 slide glass에 올린다. cell을 얇게 펴서 말린다 methanol로 고정 마르면 giemsa solution 으로 염색15min pbs로 washing x2 현미경으로 관찰 result x200 x800 discussion 이번실험은 암세포의 MITOSIS 관찰이었다. 정상세포의 MITOSIS는 DNA의 복제후 핵분열과 세포질 분열과정을 통해 동일한 크기, 형태 염색체의 수 유전물질을 가진 세포의 수를 정상적인 범위 내로 늘려준다. 그리고 텔로미어 라고하는 DNA의 양끝의 DNA의 조각들이 세포분열이 여러차례 진행되고, 텔로미어 DNA가 손실되면 더이상 세포분열을 할 수없다. 그에 반해 암세포는 .. 2009. 11. 4. 초파리 침색 염색체 관찰 결과 이번 실험은 초파리 유충의 침샘염색체 관찰인데, 침샘염색체는 보통염색체보다 100~200배 이상이나 크기 때문에 거대 염색체라고 하며, 광학현미경으로 관찰할 수 있기 때문에 모건이 선상유전자를 발견할 수 있었다. 침샘 염색체는 세포질 분열 없이 염색체 분열만 되풀이 되기 때문에 염색체가 두껍고 크기가 거대하며 관찰이 용의한것이다. 초파리의 생활사는 알 - 1령유충 - 2령유충 - 3령유충 - 번데기 - 성체 의 단계로 나뉘어져 있는데, 우리가 관찰한 유충은 3령유충이다. 3령유충을 사용한 이유로는 번데기가 되기 전 가장 탈피를 많이 해 그 크기가 가장 클 시기이기 때문에 관찰하기 제일 좋다. 유충이 배지에 묻혀있어 빼내기가 힘들었는데, 약간의 물을 부으면 배지 밖으로 유충이 빠져나온다고 한다. 사진에서 .. 2009. 10. 13. 멘델유전법칙과 반성유전 멘델의 유전학 멘델은 '자식은 왜 부모를 닮는가' 라는 질문에 다음과 가은 가정을 하였다. 1. 특정한 형질은 특정한 유전요소(오늘날 유전형으로 불리는)에 의해 결정된다. 2. 부모는 자식에게 모든 유전인자를 물려주나, 그 유전인자 서로는 우열의 관계가 있다. 3. 유전인자는 바뀌지 않고, 자손에게 이어지며, 비록 한 세대에선 보이지 않더라도 다음세대에 이어질 수 있다. 멘델의 유전법칙 1. 우열의 법칙 : 자손 1대에서는 부모의 형질 중 우성형질만 나타난다. 우성의 정의: 같은 형질만의 대립형질 순종을 교배 하였을 때, 자손 제 1세대에서 나타나는 형질 2. 분리의 법칙: 자손 제 1대 잡종끼리 교배하였을 때, 자손 제2대에서 우성과 열성이 3:1의 비율로 나타난다. 3. 독립의 법칙: 서로 다른 형질.. 2009. 9. 22. 초파리 외형 관찰 위 사진들은 리사이징 된 사진이구요 원본사진은 파일받으시면 됩니다. 사진 클릭하셔서 원본사이즈로 받으셔도 됩니다. 2009. 9. 12. 유전학 실험에서 초파리를 쓰는 이유 유전학 실험에서 초파리를 쓰는 이유 목적 유전학 실험에서 왜 초파리를 자주 쓰는지 안다. Introduction 초파리에 대하여 초파리는 절지동물(Arthropoda) 곤충강(Insecta) 에 속한다. 전 세계적으로 약 2000종의 초파리가 알려져 있으며 우리나라에도 150여 종이 있다. 그 중에서도 노랑초파리(drosophilla melanogaster)가 대표적인 종인데, 초파리는 농가에서 누룩으로 초를 만들 때 모여드는 성질 때문에 초파리(Vinegar fly) 라고 불리우게 되었는데, 과일 썩은 곳에도 잘 모이므로 과일 파리로도 불리는 초파리의 종류 중 주택부근에 가장 많은 종은 Morgan이 실험재료로 제일 처음 사용했으며, 보통 초파리라고 하면 노랑 초파리를 가르킬 정도이다. 초파리의 과학계.. 2009. 9. 9. 이전 1 2 다음
